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Mejorar la precisión de la evaluación citométrica de flujo del potencial de la membrana mitocondrial en células hematopoyéticas de tallo y progenitor a través de la inhibición de las bombas de eflujo
JoVE 신문
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JoVE 신문 생물학
Improving the Accuracy of Flow Cytometric Assessment of Mitochondrial Membrane Potential in Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Through the Inhibition of Efflux Pumps
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Mejorar la precisión de la evaluación citométrica de flujo del potencial de la membrana mitocondrial en células hematopoyéticas de tallo y progenitor a través de la inhibición de las bombas de eflujo

DOI:
10.3791/60057-v

•

07:17 min

•

July 30, 2019

•

, ,
1Ruth L. and David S. Gottesman Institute for Stem Cell and Regenerative Medicine Research,Albert Einstein College of Medicine, 2Departments of Cell Biology and Stem Cell Institute,Albert Einstein College of Medicine, 3Department of Medicine,Albert Einstein College of Medicine, 4Albert Einstein Cancer Center and Diabetes Research Center,Albert Einstein College of Medicine

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:43Bone Marrow Isolation
  • 02:22Immunostaining for Detection of Hematopoietic Stem Cells
  • 03:28TMRM Staining
  • 04:17Flow Cytometry
  • 05:38Results: Flow Cytometry Analysis of Mitochondrial Membrane Potential
  • 06:33Conclusion

Summary

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Las bombas de eflujo xenobiótico son muy activas en células hematopoyéticas madre y progenitoras (HSCCP) y causan extrusión de TMRM, un tinte fluorescente potencial de membrana mitocondrial. Aquí, presentamos un protocolo para medir con precisión el potencial de la membrana mitocondrial en los HSCCP por TMRM en presencia de Verapamil, un inhibidor de la bomba de eflujo.

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Keywords: Flow CytometryMitochondrial Membrane PotentialHematopoietic Stem CellsProgenitor CellsEfflux PumpsTMRMVerapamilBone Marrow IsolationLineage CocktailCD135

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