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인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 게놈 수정 생성
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Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells
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인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 게놈 수정 생성

DOI:
10.3791/60085-v

•

09:04 min

•

September 25, 2019

•

, , ,
1Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children’s Hospital of Philadelphia, 3Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:19Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
  • 03:50Clone Screening
  • 04:51Transfection Setup
  • 06:07Checking for Mutations in Single Colonies
  • 07:11Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
  • 08:10Conclusion

Summary

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이 프로토콜은 인간 다능성 줄기 세포에서 CRISPR-CAS9를 사용하여 정의된 이형 이형 또는 동형접합 뉴클레오티드 변화의 생성을 용이하게 하는 방법을 제공한다.

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CRISPR-Cas9Human Pluripotent Stem CellsIsogenic LinesHeterozygous MutationsGene FunctionDisease ModelingColony PickingFluorescence-activated Cell SortingMEFsROCK Inhibitor

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