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Imaging di ATP intracellulare in fette di tessuto organicino del cervello del topo utilizzando il sensore basato su FRET ATeam1.03YEMK
JoVE 신문
신경과학
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JoVE 신문 신경과학
Imaging of Intracellular ATP in Organotypic Tissue Slices of the Mouse Brain using the FRET-based Sensor ATeam1.03YEMK
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Imaging di ATP intracellulare in fette di tessuto organicino del cervello del topo utilizzando il sensore basato su FRET ATeam1.03YEMK

DOI:
10.3791/60294-v

•

11:20 min

•

December 19, 2019

•

, , , , ,
1Institute of Neurobiology,Heinrich Heine University Düsseldorf, 2Department of Neurology,Düsseldorf University Hospital

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:25Preparation of Organotypic Brain Slice Cultures (OTCs)
  • 02:58Culturing the Slices
  • 04:18Removal of the Glial Scar
  • 05:20FRET-based ATP Imaging and Documentation of Cellular ATeam Fluorescence
  • 08:21Results: Visualization of Neurons and Astrocytes
  • 10:25Conclusion

Summary

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Descriviamo un protocollo per l'espressione specifica del tipo di cellula del sensore basato su FRET codificato geneticamente ATeam1.03YEMK nelle colture di sezioni organotipiche del prosencefalo del topo. Inoltre, mostriamo come utilizzare questo sensore per l'imaging dinamico dei livelli di ATP cellulare in neuroni e astrociti.

Tags

Intracellular ATPMouse BrainFRET-based SensorATeam1.03YEMKFluorescent ImagingATP MeasurementsNeuronal ATPAstrocytic ATPEnergy MetabolismIschemic StrokeHippocampal FormationSterile ConditionsPetri DishesHanks’ Salt Solution

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