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Production d'ensembles moteurs d'adn et de kinésine sur des nanostructures d'origami d'ADN pour l'observation d'une seule molécule
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JoVE 신문 생화학
Production of Dynein and Kinesin Motor Ensembles on DNA Origami Nanostructures for Single Molecule Observation
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Production d'ensembles moteurs d'adn et de kinésine sur des nanostructures d'origami d'ADN pour l'observation d'une seule molécule

DOI:
10.3791/60369-v

•

08:09 min

•

October 15, 2019

•

,
1Department of Biological Sciences,Smith College, 2Center for Microscopy and Imaging,Smith College

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Galactose-Induced Motor Protein Growth, Expression, and Harvesting
  • 01:39Cell Lysis and Soluble Protein Extraction
  • 02:36IgG Affinity Purification
  • 03:17DNA Oligonucleotide Labeling and TEV Cleavage
  • 04:50Chassis Purification
  • 05:56Results: Representative Motor Ensemble Production
  • 07:26Conclusion

Summary

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L'objectif de ce protocole est de former des ensembles de moteurs moléculaires sur les nanostructures d'origami d'ADN et d'observer la motilité d'ensemble en utilisant la microscopie interne totale de fluorescence de réflexion.

Tags

DNA OrigamiCytoskeletal Motor ProteinsDyneinKinesinMyosinCargo TransportSingle Molecule ObservationYeast ExpressionProtein PurificationIgG Affinity Purification

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