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Produzione di Dynein e Kinesin Motor Ensemble su nanostrutture DNA Origami per l'osservazione a singola molecola
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JoVE 신문 생화학
Production of Dynein and Kinesin Motor Ensembles on DNA Origami Nanostructures for Single Molecule Observation
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Produzione di Dynein e Kinesin Motor Ensemble su nanostrutture DNA Origami per l'osservazione a singola molecola

DOI:
10.3791/60369-v

•

08:09 min

•

October 15, 2019

•

,
1Department of Biological Sciences,Smith College, 2Center for Microscopy and Imaging,Smith College

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Galactose-Induced Motor Protein Growth, Expression, and Harvesting
  • 01:39Cell Lysis and Soluble Protein Extraction
  • 02:36IgG Affinity Purification
  • 03:17DNA Oligonucleotide Labeling and TEV Cleavage
  • 04:50Chassis Purification
  • 05:56Results: Representative Motor Ensemble Production
  • 07:26Conclusion

Summary

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L'obiettivo di questo protocollo è quello di formare insiemi di motori molecolari sulle nanostrutture di origami del DNA e osservare la motilità dell'insieme utilizzando la microscopia a fluorescenza totale della riflessione interna.

Tags

DNA OrigamiCytoskeletal Motor ProteinsDyneinKinesinMyosinCargo TransportSingle Molecule ObservationYeast ExpressionProtein PurificationIgG Affinity Purification

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