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Fractionnement subcellulaire des cellules de leucémie lymphocytique chronique primaire pour surveiller le trafic de protéines nucléaires/cytoplasmiques
JoVE 신문
암 연구학
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Subcellular Fractionation of Primary Chronic Lymphocytic Leukemia Cells to Monitor Nuclear/Cytoplasmic Protein Trafficking
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Fractionnement subcellulaire des cellules de leucémie lymphocytique chronique primaire pour surveiller le trafic de protéines nucléaires/cytoplasmiques

DOI:
10.3791/60426-v

•

11:39 min

•

October 23, 2019

•

, , ,
1Paul O’Gorman Leukaemia Research Centre, Institute of Cancer Sciences, College of Medical, Veterinary and Life Sciences,University of Glasgow

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:22Isolation of Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) Cells from Patient Blood Samples
  • 03:23Preparation of Subcellular Fractions from CLL Cells
  • 05:54Preparation of Whole Cell Lysates (WCL) from CLL Cells
  • 06:32Downstream Analysis of Subcellular Fractions
  • 08:59Results: Analysis of Subcellular Fractionation of Primary Chronic Lymphocytic Leukemia Cells
  • 10:47Conclusion

Summary

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Ce protocole permet l'optimisation et la production efficace subséquente de fractions nucléaires et cytoplasmiques à partir de cellules lymphocytiques chroniques primaires. Ces échantillons sont utilisés pour déterminer la localisation des protéines ainsi que les changements dans le trafic de protéines qui ont lieu entre les compartiments nucléaire et cytoplasmique lors de la stimulation cellulaire et le traitement médicamenteux.

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Keywords: Subcellular FractionationChronic Lymphocytic LeukemiaNuclear/cytoplasmic Protein TraffickingTumor Suppressor ProteinsPathogenesisB Cell MalignanciesProtein LocalizationProtein MovementDensity Gradient CentrifugationMononuclear Cells

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