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बड़े पैमाने पर परमाणु इंटरैक्टूम प्रोफाइलिंग के लिए लेबल-फ्री इम्यूनोप्रिसिप्रिशन मास स्पेक्ट्रोमेट्री वर्कफ्लो
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Label-Free Immunoprecipitation Mass Spectrometry Workflow for Large-scale Nuclear Interactome Profiling
DOI:

11:19 min

November 17, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:07Preparation of Nuclear Extract
  • 03:45Immunoprecipitation of Endogenous Nuclear Bait Protein
  • 07:01Sample Preparation and LC/MS System Suitability
  • 09:09Results: A Single-bait Single-antibody IP-MS Experiment
  • 10:25Conclusion

Summary

자동 번역

वर्णित ब्याज और लेबल मुक्त द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री के दिए गए प्रोटीन के इम्यूनोफिनिटी संवर्धन का उपयोग करके परमाणु उपसे्युलर अंश से प्रोटीन इंटरैक्शन भागीदारों की पहचान करने के लिए एक प्रोटेओमिक्स वर्कफ्लो है। कार्यप्रवाह में उपसेलर आंशिकता, इम्यूनोप्रिसिपेटेशन, फिल्टर एडेड नमूना तैयार करना, ऑफलाइन सफाई, मास स्पेक्ट्रोमेट्री और डाउनस्ट्रीम बायोइन्फॉर्मेटिक्स पाइपलाइन शामिल है।

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