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면역학 및 감염병학
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Determinazione dell'identità e della purezza delle cellule immunitarie utilizzando la PCR quantitativa basata sull'epigenetica
JoVE 신문
면역학 및 감염병학
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Determination of Immune Cell Identity and Purity Using Epigenetic-Based Quantitative PCR
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Determinazione dell'identità e della purezza delle cellule immunitarie utilizzando la PCR quantitativa basata sull'epigenetica

DOI:
10.3791/60465-v

•

08:02 min

•

February 19, 2020

•

, , , , , , , ,
1Cell Biology, Life Sciences Solutions,Thermo Fisher Scientific, 2California Polytechnic State University (Cal Poly), 3Epiontis GmbH,Precision for Medicine

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:41Sample Preparation
  • 01:41Bisulfate Conversion
  • 02:20CD8+ T Cell and Regulatory T Cell (Treg) Assays
  • 05:28T Helper Cell 17 (Th17) Assay
  • 06:37Results: Representative Flow and Methylation Assay Data Comparisons
  • 07:30Conclusion

Summary

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Qui descriviamo un metodo robusto per determinare l'identità e la purezza delle cellule immunitarie attraverso firme epigenetiche rilevate utilizzando la PCR quantitativa (qPCR). La demetilazione del DNA in un locus specifico funge da identificatore univoco per un particolare tipo di cellula e consente l'identificazione delle cellule T CD8, normative o Th17.

Tags

Immune Cell IdentityImmune Cell PurityEpigenetic-based Quantitative PCRFlow CytometryAutomated Data AnalysisHematopoietic Cell SampleGenomic DNA IsolationBisulfite ConversionDNA PurificationParamagnetic Beads

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