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通过斯特兰德特异性RT-PCR检测患者人类免疫缺陷病毒类型1(HIV-1)反义蛋白(ASP)RNA转录本
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Detection of Human Immunodeficiency Virus Type 1 (HIV-1) Antisense Protein (ASP) RNA Transcripts in Patients by Strand-Specific RT-PCR
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通过斯特兰德特异性RT-PCR检测患者人类免疫缺陷病毒类型1(HIV-1)反义蛋白(ASP)RNA转录本
DOI:
10.3791/60511-v
•
08:01 min
•
November 27, 2019
•
Antonio Mancarella
,
Francesco A. Procopio
,
Tilmann Achsel
,
Elisa De Crignis
,
Brian T. Foley
,
Giampietro Corradin
,
Claudia Bagni
,
Giuseppe Pantaleo
,
Cecilia Graziosi
1
Division of Immunology and Allergy
,
Lausanne University Hospital
,
2
Department of Fundamental Neuroscience
,
University of Lausanne
,
3
Department of Biochemistry
,
Erasmus Medical Center
,
4
Theoretical Biology and Biophysics Group
,
Los Alamos National Laboratories
,
5
Department of Biochemistry
,
University of Lausanne
Chapters
00:04
Title
01:14
Reverse Transcription and RNA Isolation
02:49
Affinity Purification of ASP Biotinylated cDNA
04:29
Standard PCR
05:10
Results: ASP RNA Detection in CD4+ Cells from HIV Patients
06:56
Conclusion
Summary
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在没有序列特异性引录的情况下,RNA发夹和环可作为逆转录(RT)的引种,干扰重叠反义转录本的研究。我们已经开发出一种能够识别股特异性RNA的技术,并用它来研究HIV-1反义蛋白ASP。
Tags
Keywords: HIV-1
Antisense Protein (ASP)
RNA Transcripts
Strand-specific RT-PCR
Sense And Antisense Sequences
Biotinylated Primers
RNA Denaturation
Anti-sense CDNAs
Overlapping Genes
Quantification
DNase Treatment
Reverse Transcription
Endogenous RT Controls
Reaction Mixture
Magnetic Beads
Washing And Binding Buffer
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