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Caratterizzazione funzionale di RING-Type E3 Ubiquitin Ligases In Vitro e In Planta
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Functional Characterization of RING-Type E3 Ubiquitin Ligases In Vitro and In Planta
DOI:

10:27 min

December 05, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:04Site-directed Mutagenesis
  • 02:29Recombinant Protein Purification and In Vitro Ubiquitination Assay
  • 03:40Agrobacterium-mediated Transient Protein Expression in Nicotiana benthamiana Leaves and In Planta Ubiquitination Assay
  • 06:36Establishing the Link Between Enzymatic Activity and Function In Planta
  • 07:27Results: In Vitro and In Planta Ubiquitination Assay
  • 09:20Conclusion

Summary

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L'obiettivo di questo manoscritto è quello di presentare un profilo per gli studi biochimici e funzionali completi dei legamenti dell'ubiquitina E3 di tipo RING. Questa pipeline multifase, con protocolli dettagliati, convalida un'attività enzimatica della proteina testata e dimostra come collegare l'attività alla funzione.

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