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Caracterização funcional do RING-Tipo E3 Ubiquitin Ligases In Vitro e In Planta
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Functional Characterization of RING-Type E3 Ubiquitin Ligases In Vitro and In Planta
DOI:

10:27 min

December 05, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:04Site-directed Mutagenesis
  • 02:29Recombinant Protein Purification and In Vitro Ubiquitination Assay
  • 03:40Agrobacterium-mediated Transient Protein Expression in Nicotiana benthamiana Leaves and In Planta Ubiquitination Assay
  • 06:36Establishing the Link Between Enzymatic Activity and Function In Planta
  • 07:27Results: In Vitro and In Planta Ubiquitination Assay
  • 09:20Conclusion

Summary

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O objetivo deste manuscrito é apresentar um esboço para os estudos bioquímicos e funcionais abrangentes das ligaduras de ubiquitina ring-tipo E3. Este pipeline multipasso, com protocolos detalhados, valida uma atividade enzimática da proteína testada e demonstra como vincular a atividade à função.

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