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면역학 및 감염병학
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Activación y cuantificación de la expresión génica dependiente de NF--B en células de cultivo de tejido infectado por Salmonella
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
NF-κB-dependent Luciferase Activation and Quantification of Gene Expression in Salmonella Infected Tissue Culture Cells
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Activación y cuantificación de la expresión génica dependiente de NF--B en células de cultivo de tejido infectado por Salmonella

DOI:
10.3791/60567-v

•

10:57 min

•

January 12, 2020

•

,
1Department of Immunology and Microbiology,University of Colorado Anschutz Medical Campus

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:13Cell Passaging and Seeding
  • 02:51Preparation of Bacteria
  • 06:23Infection of Cells
  • 08:00Luciferase Analysis
  • 09:18Results: Luminescence Assay and RT-qPCR Analysis
  • 10:10Conclusion

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para medir rápida y fácilmente el factor nuclear kappa-light-chain-enhancer de la activación de células B activadas (NF--B) en líneas celulares que expresan las construcciones de reporteronf-B::luciferase, a través de mediciones de luminiscencia en el lisado celular. Además, la expresión génica se determina a través de RT-qPCR aislado de células infectadas con Salmonella Typhimurium.

Tags

NF-κBLuciferaseGene ExpressionSalmonellaCell CultureTranscription FactorInflammatory ResponseCytokinesChemokinesHeLa CellsReporter PlasmidCell StimulationCell CountingCell Suspension48-Well PlateBacterial CultureLB Agar Plates

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