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Identification des régulateurs des facteurs de transcription à l’aide du dépistage à débit moyen des bibliothèques à débit moyen et d’un reporter à double luciferase
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Identification of Transcription Factor Regulators using Medium-Throughput Screening of Arrayed Libraries and a Dual-Luciferase-Based Reporter
DOI:

11:32 min

March 27, 2020

,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:39Lentiviral Vector Library Preparation
  • 01:24Packaging of the Arrayed Lentiviral Library
  • 03:35Cell Infection for Screening
  • 04:48Cell Seeding for Transfection of Dual-Luciferase Reporter
  • 06:27Dual-Luciferase Reporter Transfection
  • 07:35Dual-Luciferase Activity Quantification
  • 09:02Results: Representative Arrayed Library Screening
  • 10:47Conclusion

Summary

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Pour identifier de nouveaux régulateurs des facteurs de transcription, nous avons développé une approche pour dépister les bibliothèques de RNAi lentiviral ou rétroviral à l’écran à l’aide d’un essai de reporter transcriptionnel à double base de luciferase. Cette approche offre un moyen rapide et relativement peu coûteux de filtrer des centaines de candidats dans une seule expérience.

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