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Geração de tumores pancreáticos ortotópicos e caracterização ex vivo da citotoxicidade de células T infiltrada tumoral
JoVE 신문
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Generation of Orthotopic Pancreatic Tumors and Ex vivo Characterization of Tumor-Infiltrating T Cell Cytotoxicity

Geração de tumores pancreáticos ortotópicos e caracterização ex vivo da citotoxicidade de células T infiltrada tumoral

DOI:
10.3791/60622-v

•

06:16 min

•

December 07, 2019

•

, ,
1Division of Cancer, Department of Surgery and Cancer,Imperial College London, 2Centre for Cancer and Inflammation, Barts Cancer Institute,Queen Mary University of London, 3German Center for Neurodegenerative Diseases (DZNE)

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Digestion of Pancreatic Tumors
  • 01:24Preparation of Single-cell Suspension from Digested Tumor
  • 03:04Preparing Cells for Ex Vivo Stimulation
  • 03:57Results: Flow Cytometry Analysis and Quantification of Ex Vivo Spleen- and Tumor-derived T Cell Activity
  • 05:29Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve a geração cirúrgica de tumores pancreatic ortotópicos e a digestão rápida de tumores pancreatic recentemente isolados do murine. Após a digestão, populações de células imunes viáveis podem ser usadas para análise a jusante, incluindo a estimulação ex vivo das células T para detecção intracelular de citocina por citometria de fluxo.

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Keywords: Orthotopic Pancreatic TumorsTumor-infiltrating T CellsCytotoxicityTumor DigestionEx Vivo CharacterizationTherapeutic AgentsT Cell ResponseFlow Cytometry

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