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면역학 및 감염병학
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Produção de partículas pseudodigitadas de gripe infecciosa de alto titer com glicoproteínas envelope de vírus H5N1 e H7N9 altamente patogênicos
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Production of High-Titer Infectious Influenza Pseudotyped Particles with Envelope Glycoproteins from Highly Pathogenic H5N1 and Avian H7N9 Viruses

Produção de partículas pseudodigitadas de gripe infecciosa de alto titer com glicoproteínas envelope de vírus H5N1 e H7N9 altamente patogênicos

DOI:
10.3791/60663-v

•

08:10 min

•

January 15, 2020

•

, , , , , ,
1Central Laboratory,Hang Zhou Red Cross Hospital, 2Clinical Laboratory,Yuhang District Maternity and Child Health Care Hospital

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:39Four-plasmid Cotransfection Mediated by Lipofection
  • 02:15Susceptible Cell Seeding and Pseudotyped Viral Particle Quantification
  • 04:01Infectivity Assay
  • 05:34Results: Infectivity Assay of Pseudotyped Particles
  • 06:58Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve um processo experimental para produzir partículas pseudodigitadas virais infecciosas de alto titer (pp) com glicoproteínas envelope de duas cepas de gripe A e como determinar sua infectividade. Este protocolo é altamente adaptável para desenvolver pps de qualquer outro tipo de vírus envolvidos com glicoproteínas envelope diferentes.

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Keywords: InfluenzaPseudotyped ParticlesViral Envelope GlycoproteinsH5N1H7N9BSL-2TransfectionQRT-PCRVirus ReassortmentCell CultureIncubationHarvestQuantificationBenzonase Nuclease

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