Detection of Total Reactive Oxygen Species in Adherent Cells by 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining

Hyeoncheol Kim; Xiang Xue

doi:10.3791/60682

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Detección de especies totales reactivas de oxígeno en células adherentes por 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Detection of Total Reactive Oxygen Species in Adherent Cells by 2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining

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Detección de especies totales reactivas de oxígeno en células adherentes por 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining

DOI:

10.3791/60682-v

•

04:53 min

•

June 23, 2020

•

Hyeoncheol Kim, Xiang Xue

¹Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of New Mexico

Chapters

00:04Introduction
00:32Cell Seeding and DCFH-DA Solution Preparation
01:32DCFH-DA Staining
02:12Image Acquisition and Intensity Measurement
03:29Results: Iron Treatment Increases ROS in Colorectal Cancer Cells
04:07Conclusion

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para detectar especies totales de oxígeno reactivo celular (ROS) usando 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA). Este método puede visualizar la localización de ROS celular en células adherentes con un microscopio de fluorescencia y cuantificar la intensidad ROS con un lector de placas de fluorescencia. Este protocolo es simple, eficiente y rentable.

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Método basado en la precipitación de formazán inducida por exposición a la luz azul de la tinción de ADN

Método cuantitativo y cualitativo de la esfingomielina por LC-MS con dos estable isotópicamente etiquetada especies de esfingomielina

Medición de consumo de oxígeno mitocondrial en las fibras Permeabilized de Drosophila utilizando cantidades mínimas de tejido

Microgravimetry disipativo para estudiar la dinámica de unión de la fosfolípido vinculante proteínas anexina A2 a bicapas de lípidos respaldados por el sólido utilizando un resonador de cuarzo

Medición e interpretación de las tasas de consumo de oxígeno en su totalidad operan segmentos de cabeza

Tinción fluorescente de plata de proteínas en geles de poliacrilamida

Con alto contenido de imagen para cuantificar la participación de blanco en las células adherentes

Análisis del plegamiento de la proteína, el transporte y degradación en las células vivas por pulso radiactivo Chase

Detección de sitios de ubiquitinación de proteínas por enriquecimiento de péptidos y espectrometría de masas

Estudio sobre el metabolismo de seis insecticidas sistémicos en un cultivo de suspensión celular recién establecido derivado del té (Camellia Sinensis L.) Hojas

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Medición de consumo de oxígeno mitocondrial en las fibras Permeabilized de Drosophila utilizando cantidades mínimas de tejido

Microgravimetry disipativo para estudiar la dinámica de unión de la fosfolípido vinculante proteínas anexina A2 a bicapas de lípidos respaldados por el sólido utilizando un resonador de cuarzo

Medición e interpretación de las tasas de consumo de oxígeno en su totalidad operan segmentos de cabeza

Tinción fluorescente de plata de proteínas en geles de poliacrilamida

Con alto contenido de imagen para cuantificar la participación de blanco en las células adherentes

Análisis del plegamiento de la proteína, el transporte y degradación en las células vivas por pulso radiactivo Chase

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