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गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ऑर्गेनॉइड के जेनेटिक इंजीनियरिंग के लिए यूनिवर्सल और कुशल इलेक्ट्रोपोरेशन प्रोटोकॉल
JoVE 신문
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JoVE 신문 유전학
Universal and Efficient Electroporation Protocol for Genetic Engineering of Gastrointestinal Organoids
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गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ऑर्गेनॉइड के जेनेटिक इंजीनियरिंग के लिए यूनिवर्सल और कुशल इलेक्ट्रोपोरेशन प्रोटोकॉल

DOI:
10.3791/60704-v

•

07:19 min

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February 18, 2020

•

, , , , , ,
1Department of Visceral-, Thoracic and Vascular Surgery, University Hospital Carl Gustav Carus,Technische Universität Dresden

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:50Organoid Culture and Preparation
  • 02:23Electroporation
  • 03:33Cell Seeding
  • 04:05Determination of Transfection Efficiency
  • 05:18Results: Electroporation Efficiency of Four Organoid Entities
  • 06:47Conclusion

Summary

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यह प्रोटोकॉल बड़े प्लाज्मिड (10 केबी की सीमा तक) के साथ चार अलग-अलग गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ऑर्गेनॉइड संस्थाओं के ट्रांसफेक्शन के लिए एक कुशल इलेक्ट्रोपोरेशन विधि का वर्णन करता है। यह एक दिन के भीतर किया जा सकता है और व्यापक तैयारी या विशेष, लागत गहन इलेक्ट्रोपोराशन बफ़र्स की आवश्यकता नहीं है।

Tags

ElectroporationGenetic EngineeringOrganoids3D Cell CultureTransfectionUniversal ProtocolEfficientTumor OrganoidsHealthy OrganoidsSpheroids2D Cell CultureDissociationY-27632Basal MediumElectroporation BufferPlasmid DNAImpedanceElectroporation Parameters

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