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Protocolo de Electroporación Universal y Eficiente para la Ingeniería Genética de Organoides Gastrointestinales
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Universal and Efficient Electroporation Protocol for Genetic Engineering of Gastrointestinal Organoids
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Protocolo de Electroporación Universal y Eficiente para la Ingeniería Genética de Organoides Gastrointestinales

DOI:
10.3791/60704-v

•

07:19 min

•

February 18, 2020

•

, , , , , ,
1Department of Visceral-, Thoracic and Vascular Surgery, University Hospital Carl Gustav Carus,Technische Universität Dresden

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:50Organoid Culture and Preparation
  • 02:23Electroporation
  • 03:33Cell Seeding
  • 04:05Determination of Transfection Efficiency
  • 05:18Results: Electroporation Efficiency of Four Organoid Entities
  • 06:47Conclusion

Summary

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Este protocolo describe un método de electroporación eficiente para la transfección de cuatro entidades organoides gastrointestinales diferentes con plásmidos más grandes (hasta una extensión de 10 kB). Se puede realizar en el plazo de un día y no necesita una preparación extensa o amortiguadores de electroporación especiales y costosos.

Tags

ElectroporationGenetic EngineeringOrganoids3D Cell CultureTransfectionUniversal ProtocolEfficientTumor OrganoidsHealthy OrganoidsSpheroids2D Cell CultureDissociationY-27632Basal MediumElectroporation BufferPlasmid DNAImpedanceElectroporation Parameters

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