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Preparação de amostras biológicas para especiação em temperatura criogênica usando espectroscopia de absorção de raios-X de alta resolução
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JoVE 신문 화학
Biological Samples Preparation for Speciation at Cryogenic Temperature using High-Resolution X-Ray Absorption Spectroscopy

Preparação de amostras biológicas para especiação em temperatura criogênica usando espectroscopia de absorção de raios-X de alta resolução

DOI:
10.3791/60849-v

•

06:00 min

•

May 27, 2022

•

, , , , , ,
1University Grenoble Alpes,INSERM UA7, Synchrotron Radiation for Biomedicine (STROBE), 2CNRS, UMR 5254, Université Pau & Pays Adour, E2S UPPA,Institut des Sciences Analytiques et de Physicochimie pour l’Environnement et les Matériaux, 3Institut Jacques Monod, UMR 7592 CNRS,Université Paris Diderot, 4OSUG, UMS 832 CNRS,Université Grenoble Alpes, 5FAME and FAME-UHD beamlines,ESRF, the European Synchrotron, 6ID16A beamline,ESRF, the European Synchrotron

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:51Human PC-3 and OVCAR-3 Cancer Cell Pellet Preparation
  • 02:58High Resolution X-Ray Absorption Spectroscopy (HERFD-XAS) Measuring Procedure
  • 03:40Results: Selenium (Se) and Iron (Fe) K-Edge Typical HERFD-XANES Analyses
  • 04:56Conclusion

Summary

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Este protocolo apresenta um procedimento detalhado para preparar criosamples biológicas para experimentos de espectroscopia de absorção de raios-X baseados em síncrotrons. Descrevemos todas as etapas necessárias para otimizar a preparação da amostra e a criopreservação com exemplos do protocolo com células cancerígenas e fitoplâncton. Este método fornece um padrão universal de preparação crio-de-amostra.

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Keywords: Biological SamplesSpeciationCryogenic TemperatureX-ray Absorption SpectroscopyCell PelletsSelenium TreatmentCell CultureCancer Cell LinesSample PreparationCentrifugationCryosampleSynchrotron

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