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아실-레신 보조 포획을 이용한 단백질 S-아실레이션 검출

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JoVE 신문 생화학

Detection of Protein S-Acylation using Acyl-Resin Assisted Capture

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아실-레신 보조 포획을 이용한 단백질 S-아실레이션 검출

DOI:

10.3791/61016-v

•

08:31 min

•

April 10, 2020

•

Ritika Tewari*¹, Savannah J. West*^1,2, Bieerkehazi Shayahati, Askar M. Akimzhanov

¹Department of Biochemistry and Molecular Biology,McGovern Medical School at UT Health, ²MD Anderson UT Health Graduate School

Chapters

00:04Introduction
01:25Cell Lysate Preparation
02:26Acyl-Resin Assisted Capture (Acyl-RAC): Free Thiol Group Blocking
03:54Acyl-RAC: Hydroxylamine (HAM) Cleavage and S-Acylated Protein Capture
05:52S-Acylated Protein Elution and Detection
06:52Results: Representative S-Acylated Protein Detection
07:43Conclusion

Summary

자동 번역

아실-RAC(Acyl-Resin Assisted Capture)는 다양한 생물학적 샘플에서 시스테인 잔류물(S-acylation)의 가역적 지질 변형을 검출하는 매우 민감하고 신뢰할 수 있으며 수행하기 쉬운 방법입니다.

Tags

Keywords: Acyl-resin Assisted Capture Acyl-RAC Protein S-acylation Thioester Bond Cleavage Chloroform-methanol Precipitation Protein Pellet Cell Lysis Protein Concentration Estimation Bradford Assay BCA Assay

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