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Imunostaining de Testes Drosophila de Monte Inteiro para Análise Confocal 3D de Grandes Espermatocitos
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JoVE 신문 생물학
Immunostaining of Whole-Mount Drosophila Testes for 3D Confocal Analysis of Large Spermatocytes

Imunostaining de Testes Drosophila de Monte Inteiro para Análise Confocal 3D de Grandes Espermatocitos

DOI:
10.3791/61061-v

•

08:37 min

•

August 27, 2020

•

, ,
1CNRS, Institut Jacques Monod,Université de Paris, F 75006, Paris, France

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:47Drosophila Testes Collection
  • 02:14Paraformaldehyde Fixation
  • 03:11Antibody Staining
  • 06:11Results: Representative Whole-Mount Drosophila Testis Immunostaining and 3D Confocal Analysis
  • 07:54Conclusion

Summary

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Apresentamos aqui um protocolo aprimorado para a preparação e imunossagem completa de testículos Drosophila, adequados para microscopia confocal e também permitindo rotulagem reprodutível e confiável. Ilustramos este protocolo por representação 3D e quantificação de experimentos de colocalização nos grandes espermatos S4-S5.

Tags

Keywords: Whole-mount ImmunostainingDrosophila Testes3D Confocal AnalysisSpermatocytesNP40HeptaneFixation ProtocolAntibody PenetrationQuantifiable LabelingDiploid Germ Cell EvaluationRinger’s BufferParaformaldehydePBS-TPermeabilizationBlocking3D Imaging

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