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नैनोफ्लुइडिक तकनीक का उपयोग करके एकल और बल्क सी एलिगेंस नमूनों में उच्च-थ्रूपुट मात्रात्मक आरटी-पीसीआर
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
High-Throughput Quantitative RT-PCR in Single and Bulk C. elegans Samples Using Nanofluidic Technology
DOI:

08:19 min

May 28, 2020

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Worm-to-CT Worm Lysis
  • 02:08Reverse Transcription (RT) for Bulk Samples
  • 02:38Target Specific Preamplification
  • 03:19Exonuclease I Treatment
  • 03:53Sample Mix Preparation
  • 04:48Nanofluidic Chip Priming and Loading
  • 06:00Results: Representative Worm-to-CT Analysis
  • 07:45Conclusion

Summary

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इस लेख में एकल या थोक सी elegans नमूनों में जीन अभिव्यक्ति के स्तर के तेजी से और विश्वसनीय निर्धारण के लिए एक उच्च थ्रूपुट प्रोटोकॉल वर्णित है । इस प्रोटोकॉल आरएनए अलगाव की आवश्यकता नहीं है और नमूनों से सीधे सीडीएनए का उत्पादन करता है। इसका उपयोग उच्च-थ्रूपुट मल्टीप्लेक्स्ड नैनोफ्लुइडिक रियल-टाइम क्यूपीसीआर प्लेटफार्मों के साथ किया जा सकता है।

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