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RT-PCR quantitativo ad alta produttività in campioni C. elegans singoli e sfusi che utilizzano la tecnologia nanofluidica
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
High-Throughput Quantitative RT-PCR in Single and Bulk C. elegans Samples Using Nanofluidic Technology
DOI:

08:19 min

May 28, 2020

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Worm-to-CT Worm Lysis
  • 02:08Reverse Transcription (RT) for Bulk Samples
  • 02:38Target Specific Preamplification
  • 03:19Exonuclease I Treatment
  • 03:53Sample Mix Preparation
  • 04:48Nanofluidic Chip Priming and Loading
  • 06:00Results: Representative Worm-to-CT Analysis
  • 07:45Conclusion

Summary

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In questo articolo viene descritto un protocollo ad alta produttività per una determinazione rapida e affidabile dei livelli di espressione genica in campioni C. elegans singoli o sfusi. Questo protocollo non richiede l'isolamento dell'RNA e produce cDNA direttamente dai campioni. Può essere utilizzato insieme a piattaforme qPCR multiplexate ad alta produttività in tempo reale.

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