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Super-Resolution Imaging zur Untersuchung der Kolokalisierung von Proteinen und synaptischen Markern in primärer Neuronen
JoVE 신문
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JoVE 신문 신경과학
Super-Resolution Imaging to Study Co-Localization of Proteins and Synaptic Markers in Primary Neurons
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Super-Resolution Imaging zur Untersuchung der Kolokalisierung von Proteinen und synaptischen Markern in primärer Neuronen

DOI:
10.3791/61434-v

•

14:02 min

•

October 31, 2020

•

, , , , , , , ,
1Department of Molecular Biochemistry and Pharmacology,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS, 2Department of Neuroscience,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS, 3Dulbecco Telethon Institute,Istituto di Ricerche Farmacologiche Mario Negri IRCCS

Chapters

  • 00:00Introduction
  • 01:04Primary Cultures
  • 01:48Immunofluorescence Staining
  • 03:32SIM Microscopy
  • 04:01Microscope Calibration
  • 07:11Acquisition
  • 09:24Post-production: Image Reconstruction
  • 11:24Colocalization with Profile Analysis
  • 12:05Quantification of Pearson’s and Mander’s
  • 12:27Results
  • 13:16Conclusions

Summary

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Dieses Protokoll zeigt, wie man eine hochauflösende Mikroskopie einsetzt, um die Proteinkolokalisierung in primären neuronalen Kulturen zu untersuchen.

Tags

Super-resolution ImagingCo-localizationPrimary NeuronsSynaptic MarkersStructured Illumination Microscopy (SIM)Neurodegenerative DisordersHippocampal NeuronsFixationImmunostainingMounting SolutionCoverglass

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