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Isoler les cellules mononucléaires du sang périphérique humain et les lymphocytes T CD4+ de patients atteints du syndrome de Sézary pour le profilage transcriptomique
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Isolating Human Peripheral Blood Mononuclear Cells and CD4+ T cells from Sézary Syndrome Patients for Transcriptomic Profiling
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Isoler les cellules mononucléaires du sang périphérique humain et les lymphocytes T CD4+ de patients atteints du syndrome de Sézary pour le profilage transcriptomique

DOI:
10.3791/61470-v

•

09:08 min

•

October 14, 2021

•

, ,
1Department of Dermatology,University of Arkansas for Medical Sciences

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:17Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
  • 03:42CD4+CD45RO+ T Cell Purification
  • 05:18Chemical Activation
  • 07:00Results: Representative CD4+CD45RO+ T Cell Purity and Gene Expression Analysis
  • 08:01Conclusion

Summary

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Nous présentons un protocole simple pour l’isolement des cellules mononucléaires du sang périphérique du sang total obtenu chez des patients diagnostiqués avec le syndrome de Sézary, suivi de la sélection des lymphocytes T CD4+, de leur stimulation par phorbol12-myristate13-acétate et ionophore A23187, et de la préparation de l’ARN pour le profilage transcriptomique.

Tags

Peripheral Blood Mononuclear CellsCD4+ T CellsSézary SyndromeTranscriptomic ProfilingLymphocyte IsolationCell FractionationCell PurificationMolecular DefectsPathogenesisAnticoagulantDensity MediumBuffy CoatACK Lysis Buffer

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