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Isolierung menschlicher mononukleärer Blutzellen und CD4+ T-Zellen von Patienten mit Sézary-Syndrom für transkriptomisches Profiling
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Isolating Human Peripheral Blood Mononuclear Cells and CD4+ T cells from Sézary Syndrome Patients for Transcriptomic Profiling
DOI:

09:08 min

October 14, 2021

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:17Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
  • 03:42CD4+CD45RO+ T Cell Purification
  • 05:18Chemical Activation
  • 07:00Results: Representative CD4+CD45RO+ T Cell Purity and Gene Expression Analysis
  • 08:01Conclusion

Summary

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Wir präsentieren ein einfaches Protokoll für die Isolierung von peripheren mononukleären Blutzellen aus Vollblut, das von Patienten mit diagnostiziertem Sézary-Syndrom gewonnen wurde, gefolgt von der Auswahl von CD4+ T-Zellen, ihrer Stimulation mit Phorbol12-Myristat13-Acetat und A23187-Ionophor und der Vorbereitung von RNA für die transkriptomische Profilerstellung.

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