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Isolando células mononucleares de sangue periféricos humanos e células T CD4+ de pacientes com síndrome de Sézary para perfil transcriômico
JoVE 신문
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JoVE 신문 암 연구학
Isolating Human Peripheral Blood Mononuclear Cells and CD4+ T cells from Sézary Syndrome Patients for Transcriptomic Profiling

Isolando células mononucleares de sangue periféricos humanos e células T CD4+ de pacientes com síndrome de Sézary para perfil transcriômico

DOI:
10.3791/61470-v

•

09:08 min

•

October 14, 2021

•

, ,
1Department of Dermatology,University of Arkansas for Medical Sciences

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:17Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
  • 03:42CD4+CD45RO+ T Cell Purification
  • 05:18Chemical Activation
  • 07:00Results: Representative CD4+CD45RO+ T Cell Purity and Gene Expression Analysis
  • 08:01Conclusion

Summary

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Apresentamos um protocolo simples para o isolamento de células mononucleares de sangue periférico de sangue inteiro obtidos de pacientes diagnosticados com Síndrome de Sézary, seguido pela seleção de células T CD4+, sua estimulação com phorbol12-myristate13-acetato e ionóforo A23187, e preparação de RNA para perfil transcriômico.

Tags

Keywords: Peripheral Blood Mononuclear CellsCD4+ T CellsSézary SyndromeTranscriptomic ProfilingLymphocyte IsolationCell FractionationCell PurificationMolecular DefectsPathogenesisAnticoagulantDensity MediumBuffy CoatACK Lysis Buffer

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