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Kernisolierung aus ganzem Gewebe mit einer Waschmittel- und enzymfreien Methode
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Nuclei Isolation from Whole Tissue using a Detergent and Enzyme-Free Method
DOI:

07:00 min

June 24, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparation for Tissue Dissection
  • 01:36Zebrafish Brain Dissection and Single Nuclei Isolation
  • 03:59FACS Based Nuclei Enrichment
  • 05:16Results: Single Nuclei Isolation and Enrichment
  • 06:04Conclusion

Summary

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Die Isolierung einzelner Kerne beruht auf der Dissoziation und der Waschmittel-basierten Permeabilisierung der Zellmembran, Schritte, die optimiert werden müssen und anfällig für die Einführung technischer Artefakte sind. Wir zeigen ein Waschmittel- und enzymfreies Protokoll zur schnellen Isolierung intakter Kerne direkt aus dem gesamten Gewebe, das Kerne liefert, die für Single-Nucleus RNA-seq (snRNA-Seq) oder ATAC-seq geeignet sind.

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