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CRISPR媒介ベース・エディタを用いた BRCA1 バリアントの機能評価

JoVE 신문
암 연구학

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JoVE 신문 암 연구학

Functional Assessment of BRCA1 variants using CRISPR-Mediated Base Editors

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CRISPR媒介ベース・エディタを用いた BRCA1 バリアントの機能評価

DOI:

10.3791/61557-v

•

09:22 min

•

February 28, 2021

•

Ji-Eun See², Ha Rim Shin², Gayoung Jang², Jiyeon Kweon², Yongsub Kim²

¹Department of Biomedical Sciences, Asan Medical Institute of Convergence Science and Technology, Asan Medical Center,University of Ulsan College of Medicine, ²Stem Cell Immunomodulation Research Center,University of Ulsan College of Medicine

Chapters

00:05Introduction
01:03Design and Construction of BRCA1 Targeting gRNAs
03:17Creation of BRCA1 Variants using CRISPR-mediated Base Editing Tools
04:15Sample Preparation for Illumina Next-Generation Sequencing (NGS)
07:01Results: Functional Study of BRCA1 using CRISPR-Cas9 Systems
08:34Conclusion

Summary

자동 번역

BRCA1突然変異を有する人々は、BRCA1変異体の機能の正確な評価を保証する癌を発症するリスクが高い。本明細書において、生細胞における標的C:GからT:A変換を可能にするCRISPR媒介シトシンベースエディタを用いたBRCA1変異体の機能評価用プロトコルについて説明した。

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Keywords: BRCA1 CRISPR Base Editors Functional Assessment Point Mutations Cancer Drug Targets Genome Sequence Guide RNA Oligonucleotides Plasmid DNA Transformation Sanger Sequencing HAP1-BE3 Cells Transfection

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