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면역학 및 감염병학
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Construindo Mutantes na Cepa 519/43 do Streptococcus pneumoniae do Serotipo 1
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Constructing Mutants in Serotype 1 Streptococcus pneumoniae strain 519/43

Construindo Mutantes na Cepa 519/43 do Streptococcus pneumoniae do Serotipo 1

DOI:
10.3791/61594-v

•

06:06 min

•

September 11, 2020

•

, , , ,
1Faculty of Infections and Tropical Diseases, Department of Infection Biology,London School of Hygiene and Tropical Medicine, 2Division of Medicine,University College London, 3Division of Infection and Immunity,University College London UCL

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:35Generation of Plasmid pSD1 and Chemical Transformation of E. coli Dh5α
  • 02:03Plasmid DNA Extraction, Restriction Digestion of pSD1 and Spectinomycin Gene, and Assembly of pSD2
  • 03:03Transformation of S. pneumoniae Strain 519/43
  • 04:46Results: Confirmation of Mutagenesis
  • 05:43Conclusion

Summary

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Aqui, descrevemos uma cepa 519/43 do sorotipo 1 de S. pneumoniae que pode ser geneticamente modificada usando sua capacidade de adquirir naturalmente DNA e um plasmídeo suicida. Como prova de princípio, um mutante isogênico no gene da pneumolisina (plys) foi feito.

Tags

Serotype 1 Streptococcus PneumoniaeGenetic ModificationPlasmid ConstructionPSD1PSD2Spectinomycin CassetteRestriction DigestionLigationE. Coli TransformationS. Pneumoniae Culture

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