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在革兰氏负性细菌中生成跨波子插入库，用于高通量测序
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Generating Transposon Insertion Libraries in Gram-Negative Bacteria for High-Throughput Sequencing
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在革兰氏负性细菌中生成跨波子插入库，用于高通量测序

DOI:
10.3791/61612-v

•

08:19 min

•

July 07, 2020

•

, ,
1Department of Biology,University of Texas at Arlington

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:57Bacterial Mating
  • 02:47Generation of Final Bacterial Mutant Library
  • 04:11DNA Shearing and Poly-C Tail Addition
  • 06:23Results: Transposon Mutant Library
  • 07:31Conclusion

Summary

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我们描述了一种在Gram-阴性细菌中生成饱和变性突变库的方法，以及随后制备用于高通量测序的DNA安培库。例如，我们关注ESKAPE病原体 ，Acineto细菌鲍曼尼，但这个协议是适用于广泛的革兰阴性生物。

Tags

Transposon Insertion LibraryGram-negative BacteriaHigh-throughput SequencingEssential GenesAntibiotic ResistanceIn Vivo FitnessMechanical ShearingPoly-CTLRestriction EnzymesAdapter LigationBacterial GeneticsGenotype-phenotype RelationshipsMatingDiaminopimelic AcidGlycerolFrozen Stock

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