Transillumination-Assisted Dissection of Specific Stages of the Mouse Seminiferous Epithelial Cycle for Downstream Immunostaining Analyses

Juho-Antti M&#228;kel&#228;; Sheyla Cisneros-Montalvo; Tiina Lehtiniemi; Opeyemi Olotu; Hue  M. La; Jorma Toppari; Robin  M. Hobbs; Martti Parvinen; Noora Kotaja

doi:10.3791/61800

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Dissection assistée par transillumination d’étapes spécifiques du cycle épithélial séminifique de la souris pour les analyses d’immunostaining en aval

JoVE 신문
발생학

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JoVE 신문 발생학

Transillumination-Assisted Dissection of Specific Stages of the Mouse Seminiferous Epithelial Cycle for Downstream Immunostaining Analyses

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Dissection assistée par transillumination d’étapes spécifiques du cycle épithélial séminifique de la souris pour les analyses d’immunostaining en aval

DOI:

10.3791/61800-v

•

09:59 min

•

October 07, 2020

•

Juho-Antti Mäkelä, Sheyla Cisneros-Montalvo, Tiina Lehtiniemi, Opeyemi Olotu, Hue M. La⁴, Jorma Toppari², Robin M. Hobbs⁴, Martti Parvinen, Noora Kotaja

¹Institute of Biomedicine, Integrative Physiology and Pharmacology Unit,University of Turku, Turku, Finland, ²Department of Pediatrics,Turku University Hospital, Turku, Finland, ³Centre for Reproductive Health,Hudson Institute of Medical Research, Melbourne, VIC 3168, Australia, ⁴Australian Regenerative Medicine Institute,Monash University, Melbourne, VIC 3800, Australia

Chapters

00:04Introduction
00:51Testis Dissection and Preparation
02:10Transillumination-Assisted Microdissection
02:47Squash Preparation and Stage Verification
04:04Whole-Mount Seminiferous Tubule Immunostaining
07:04Results: Representative Mouse Seminiferous Epithelial Cycle Staging
09:16Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit la microdissection transillumination-aidée des segments des tubules séminifères adultes de souris représentant des étapes spécifiques du cycle épithélial séminifère, et des types de cellules là, et l’immunostaining suivant des préparations de courge et des segments intacts de tubule.

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-Étape spécifique de tri Spermatides souris par cytométrie en flux

Isolement de souris endométriale épithéliales et stromales Cellules pour<em> In vitro</em> decidualization

Dissection et culture du rein embryonnaire de la souris

Dissection et préparation de tranches coronales de développer la glande pituitaire souris

Une Technique de Squash de tube séminifère pour l’analyse cytologique de la spermatogenèse en utilisant le modèle de souris

Analyse transcriptomique unicellulaire de cellules endocrines pancréatiques de souris

Préparation des tissus et immunostaining des tissus craniofacial de souris et de l'os non décalcifié

Isolement et coloration des kératinocytes de peau de souris pour l'analyse spécifique de cycle cellulaire de l'expression cellulaire de protéine par cytométrie de masse

Dissection, culture et analyse des cellules neurales primaires de crête neurale de la souris pour l'étude de la délamination et de la migration neurales de cellules de crête

Imagerie et analyse de l’orientation tissulaire et de la dynamique de croissance dans l’épithélie de drosophile en développement pendant les stades pupal

Dissection assistée par transillumination d’étapes spécifiques du cycle épithélial séminifique de la souris pour les analyses d’immunostaining en aval

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Isolement de souris endométriale épithéliales et stromales Cellules pour<em> In vitro</em> decidualization

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Dissection et préparation de tranches coronales de développer la glande pituitaire souris

Une Technique de Squash de tube séminifère pour l’analyse cytologique de la spermatogenèse en utilisant le modèle de souris

Analyse transcriptomique unicellulaire de cellules endocrines pancréatiques de souris

Préparation des tissus et immunostaining des tissus craniofacial de souris et de l'os non décalcifié

Isolement et coloration des kératinocytes de peau de souris pour l'analyse spécifique de cycle cellulaire de l'expression cellulaire de protéine par cytométrie de masse

Dissection, culture et analyse des cellules neurales primaires de crête neurale de la souris pour l'étude de la délamination et de la migration neurales de cellules de crête

Imagerie et analyse de l’orientation tissulaire et de la dynamique de croissance dans l’épithélie de drosophile en développement pendant les stades pupal

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