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Deux approches cytométriques en flux de détection de surface de ligand NKG2D pour distinguer les cellules souches des sous-populations en vrac dans la leucémie myéloïde aiguë
JoVE 신문
암 연구학
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JoVE 신문 암 연구학
Two Flow Cytometric Approaches of NKG2D Ligand Surface Detection to Distinguish Stem Cells from Bulk Subpopulations in Acute Myeloid Leukemia
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Deux approches cytométriques en flux de détection de surface de ligand NKG2D pour distinguer les cellules souches des sous-populations en vrac dans la leucémie myéloïde aiguë

DOI:
10.3791/61803-v

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05:24 min

•

February 21, 2021

•

, , , , , ,
1Department of Biomedicine,University Hospital Basel and University of Basel, 2Division for Hematology,University Hospital Basel and University of Basel, 3Department of Internal Medicine, Hematology and Oncology,University Hospital Tübingen

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:43Biotinylation of the NKG2D Fusion Protein and Thawing of Primary AML Cells
  • 02:00Staining of Primary AML Cells with the Biotinylated NKG2D Fusion Protein
  • 03:24Results: Gating Strategy and Staining Protocol Comparison
  • 04:49Conclusion

Summary

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Nous présentons deux protocoles de souillure différents pour la détection du ligand NKG2D (NKG2DL) dans les échantillons humains primaires de leucémie myéloïde aiguë (AML). La première approche est basée sur une protéine de fusion, capable de reconnaître tous les ligands connus et potentiellement encore inconnus, tandis que le second protocole repose sur l’ajout de plusieurs anticorps anti-NKG2DL.

Tags

NKG2D LigandsFlow CytometryAcute Myeloid LeukemiaLeukemic Stem CellsCell Surface DetectionBiotinylated NKG2D Fusion ProteinStreptavidin PE

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