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重合・脱重合サイクルによる限定的な供給源からの制御された翻訳後修飾と同一型を用いたチューブリンの精製
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Purification of Tubulin with Controlled Posttranslational Modifications and Isotypes from Limited Sources by Polymerization-Depolymerization Cycles
DOI:

07:54 min

November 05, 2020

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
  • 02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
  • 03:46Sample Preparation for Analysis
  • 04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
  • 06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
  • 07:19Conclusion

Summary

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このプロトコルは、培養細胞や単一マウス脳などの中小規模の源からのチューブリン精製を、重合および非重合サイクルを用いて記述する。精製されたチューブリンは、特定のアイソタイプで濃縮されるか、または特定の翻訳後修飾を有し、微小管のダイナミクスおよび相互作用を研究するためにインビトロ再構成アッセイで使用することができる。

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