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중합-비합화 주기에 의해 제한된 소스에서 제어 된 번역 후 수정 및 동형으로 투불린의 정화

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Purification of Tubulin with Controlled Posttranslational Modifications and Isotypes from Limited Sources by Polymerization-Depolymerization Cycles

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중합-비합화 주기에 의해 제한된 소스에서 제어 된 번역 후 수정 및 동형으로 투불린의 정화

DOI:

10.3791/61826-v

•

07:54 min

•

November 05, 2020

•

Satish Bodakuntla*^1,2, A.S. Jijumon*^1,2, Carsten Janke², Maria M. Magiera²

¹PSL Research University, CNRS UMR3348,Institut Curie, ²Université Paris-Saclay, CNRS UMR3348,Université Paris Sud

Chapters

00:05Introduction
00:34Amplification and Lysis of Cells in Suspension Cultures
02:08Amplification and Lysis of Adherent Cells and Mouse Brain Tissue Lysis
03:46Sample Preparation for Analysis
04:10Clarification, Polymerization, and Depolymerization of the Lysate
06:27Evaluation, Quantification, and Characterization of Purified Tubulin
07:19Conclusion

Summary

자동 번역

이 프로토콜은 중합 및 중합 주기를 사용하여 배양 된 세포 또는 단일 마우스 뇌와 같은 중소 규모의 소스에서 튜룰린 정제를 설명합니다. 정제 된 튜룰린은 특정 동종형으로 풍부해지거나 특정 번역 후 변형을 가지며 체외 재관체 검사에서 미세 tubule 역학 및 상호 작용을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

Tags

Tubulin Purification Posttranslational Modifications Isotypes Polymerization-depolymerization Cycles Suspension Cultures Adherent Cell Cultures Cell Harvesting Lysis Buffer PBS-EDTA

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