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Einzelzell-Multiplex-Fluoreszenzbildgebung zur Visualisierung viraler Nukleinsäuren und Proteine und zur Überwachung von HIV-, HTLV-, HBV-, HCV-, Zika-Virus- und Influenza-Infektionen
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JoVE 신문 생물학
Single-Cell Multiplexed Fluorescence Imaging to Visualize Viral Nucleic Acids and Proteins and Monitor HIV, HTLV, HBV, HCV, Zika Virus, and Influenza Infection
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Einzelzell-Multiplex-Fluoreszenzbildgebung zur Visualisierung viraler Nukleinsäuren und Proteine und zur Überwachung von HIV-, HTLV-, HBV-, HCV-, Zika-Virus- und Influenza-Infektionen

DOI:
10.3791/61843-v

•

07:24 min

•

October 29, 2020

•

, , , , ,
1Laboratory of Biochemical Pharmacology, Department of Pediatrics,Emory University School of Medicine, 2Department of Molecular Microbiology & Immunology,University of Missouri School of Medicine

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:24Cell Seeding, Fixation and Permeabilization
  • 01:40Coverslip Immobilization and Protease Treatment
  • 02:31Target Probe and Amplifier Hybridization
  • 03:40Protein Immunostaining and Nuclear Counterstaining
  • 04:48Mounting
  • 05:28Results: Representative Single‐Cell Multiplexed Fluorescence Imaging
  • 06:54Conclusion

Summary

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Hier wird ein Protokoll für einen Fluoreszenzbildgebungsansatz vorgestellt, multiplex immunofluorescent cell-based detection of DNA, RNA, and protein (MICDDRP), eine Methode, die in der Lage ist, gleichzeitig Fluoreszenz-Einzelzellvisualisierung von viralen Proteinen und Nukleinsäuren unterschiedlicher Art und Strandung zu visualisieren. Dieser Ansatz kann auf eine Vielzahl von Systemen angewendet werden.

Tags

Single-cellMultiplexedFluorescenceImagingViralNucleic AcidsProteinsHIVHTLVHBVHCVZikaInfluenzaImmunofluorescenceCell-based DetectionDNARNAProteinPoly-D-lysinePermeabilizationProteaseHybridizationMicroscopy

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