/

/

막 단백질을 미리 형성된 나노디스크에 공동 번역 삽입

JoVE 신문
생화학

JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.

JoVE 신문 생화학

Co-Translational Insertion of Membrane Proteins into Preformed Nanodiscs

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

막 단백질을 미리 형성된 나노디스크에 공동 번역 삽입

DOI:

10.3791/61844-v

•

08:24 min

•

November 19, 2020

•

Roman Levin, Zoe Koeck, Volker Dötsch, Frank Bernhard

¹Institute of Biophysical Chemistry,Goethe University Frankfurt

Chapters

00:05Introduction
00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
07:40Conclusion

Summary

자동 번역

사전 형성된 나노디스크에 공동 번역하여 삽입하면 세제와의 접촉 없이 정의된 지질 환경에서 무세포 합성된 막 단백질을 연구할 수 있습니다. 이 프로토콜은 필수 시스템 구성 요소의 준비와 발현 효율성 및 샘플 품질을 개선하기 위한 중요한 파라미터를 설명합니다.

Tags

Keywords: Co-translational Insertion Membrane Proteins Nanodisc Detergent-free Protein Folding Lipid Effects Cell-free Expression Membrane Scaffold Protein Cell Disruption Dialysis

Article

Embed

플레이리스트에 추가

Usage Statistics

Related Videos

비계 리포좀을 사용하여 근위 지질 단백질 - 단백질 상호 작용을 재구성<em> 체외</em

방법은 시각화 및 투과 전자 현미경에 의해 막 상호 작용하는 단백질을 분석하는

질소 현상과 차등 원심 분리 배양된 세포의 주변 막 단백질의 분포를 모니터링 가능

세제 없는 보완 청구 Proteoliposomes Fusogenic를 사용 하 여 지질 Bilayers에 막 단백질의 초고속 재구성.

세제에 민감한 막 단백질 사이 상호 작용의 탐지

셀 연락처에서 단백질 단백질 상호 작용의 형광 변동 분광학 분석 결과

세균성 병원체 지방산 을 막 인지질로 통합하는 연구를 위해 닭 계란 노른자에서 지단백질 입자의 분리

스모를 이용한 스모 변성 단백질의 국 소화-단백질 포착

PeptiQuick, 간소화 된 단백질 결합 검정을 위한 생체 면역 펩티디스크에 막 단백질의 한 단계 통합

아실-PEGyl 교환 젤 시프트 분석은 뇌막 단백질의 팔미토일화의 정량적 측정을 위한 것입니다.

Read Article