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Isolement d’adipocytes viables et d’une fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux viscéral humain adapté à l’analyse de l’ARN et au phénotypage des macrophages
JoVE 신문
의학
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JoVE 신문 의학
Isolation of Viable Adipocytes and Stromal Vascular Fraction from Human Visceral Adipose Tissue Suitable for RNA Analysis and Macrophage Phenotyping
DOI:

06:22 min

October 27, 2020

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Chapters

  • 00:00Introduction
  • 00:46Visceral Adipose Tissue Collection and Enzymatic Digestion
  • 02:10RNA Extraction from Mature Adipocytes and microRNA Quantification Assay
  • 03:16Characterization of Macrophage Subsets from Stromal Vascular Fraction
  • 04:42Results: Identification of Macrophages from Visceral Adipose Tissue
  • 06:02Conclusion

Summary

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Ce protocole fournit une méthode efficace de digestion de la collagénase pour isoler des adipocytes viables et des cellules stromales de fraction vasculaire-SVF de la graisse viscérale humaine en un seul processus, y compris une méthodologie pour obtenir un ARN de haute qualité à partir d’adipocytes et la phénotypification des macrophages SVF par coloration de plusieurs marqueurs membranaires pour analyse par cytométrie en flux.

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