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Imaging a cellule vive di array a cella singola (LISCA) - una tecnica versatile per quantificare la cinetica cellulare
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Live-cell Imaging of Single-Cell Arrays (LISCA) – a Versatile Technique to Quantify Cellular Kinetics
DOI:

10:24 min

March 18, 2021

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:30Microstructured Single Cell Array Fabrication
  • 03:16Cell Seeding
  • 04:21Perfusion System
  • 05:13Time-Lapse Microscopy
  • 06:44Fluorescent Marker mRNA Transfection
  • 07:34Image Analysis and Fluorescence Readout
  • 08:29Results: Representative Image Analysis and Fluorescence Readout
  • 09:34Conclusion

Summary

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Presentiamo un metodo per l'acquisizione di corsi di tempo reporter a fluorescenza da singole cellule utilizzando array micropatterned. Il protocollo descrive la preparazione di array a cella singola, la configurazione e il funzionamento della microscopia time-lapse di scansione a celle vive e uno strumento di analisi delle immagini open source per la preselezione automatizzata, il controllo visivo e il tracciamento dei corsi di tempo di fluorescenza integrati nelle celle per sito di adesione.

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