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Einsatz des GAL4-UAS-Systems für die funktionelle Genetik bei Anopheles gambiae
JoVE 신문
유전학
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JoVE 신문 유전학
Using the GAL4-UAS System for Functional Genetics in Anopheles gambiae
DOI:

06:29 min

April 15, 2021

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:49Collection of Pupae for Microscopic Characterization and Identification of Fluorescent Markers
  • 01:45Sexing Pupae
  • 02:25Setting Up GAL4-UAS (Upstream Activation Sequences) System Crosses and Inducing Egg Laying
  • 03:20Embryo Fixation and Bleaching
  • 04:15Results: Analysis of Anopheles gambiae Pupae Expressing Fluorescent Markers Driven by 3xP3 Promoter, Tissue-specific Expression Visualization, and Embryo Clearing
  • 05:53Conclusion

Summary

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Das bipartite GAL4-UAS-System ist ein vielseitiges Werkzeug zur Modifikation der Genexpression in kontrolliert raumzeitlicher Weise, das eine funktionelle genetische Analyse in Anopheles gambiae ermöglicht. Die beschriebenen Verfahren für die Verwendung dieses Systems sind eine semi-standardisierte Klonierungsstrategie, Sexing und Screening von Puppen auf fluoreszierende Proteinmarker und Embryofixierung.

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