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TGF-β-vermittelter endothelialer zu mesenchymaler Übergang (EndMT) und die funktionelle Bewertung von EndMT-Effektoren mittels CRISPR/Cas9-Gen-Editing
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
TGF-β-mediated Endothelial to Mesenchymal Transition (EndMT) and the Functional Assessment of EndMT Effectors using CRISPR/Cas9 Gene Editing
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TGF-β-vermittelter endothelialer zu mesenchymaler Übergang (EndMT) und die funktionelle Bewertung von EndMT-Effektoren mittels CRISPR/Cas9-Gen-Editing

DOI:
10.3791/62198-v

•

07:05 min

•

February 26, 2021

•

, , ,
1Dept. Cell Chemical Biology,Leiden University Medical Center, 2Oncode Institute,Leiden University Medical Center

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:39Transforming Growth Factor-β2 (TGF-β2)-Induced Endothelial to Mesenchymal Transition (EndMT)
  • 03:10EndMT-Related Marker Change Evaluation
  • 05:00Results: Representative TGF-β2-Induced EndMT in MS-1 Cells
  • 06:17Conclusion

Summary

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Wir beschreiben Methoden zur Untersuchung von TGF-β2-induzierter EndMT in Endothelzellen, indem wir Veränderungen der Zellmorphologie beobachten und die Expression EndMT-bedingte Markerveränderungen mittels Immunfluoreszenzfärbung untersuchen. CrispR/Cas9-Gen-Editing wurde beschrieben und verwendet, um das Gen zu erschöpfen, das für Snail kodiert, um seine Rolle bei TGF-β2-induzierter EndMT zu untersuchen.

Tags

Keywords: Endothelial To Mesenchymal TransitionTGF-betaMesenchymal MarkersCell PermeabilizationImmunofluorescence StainingCRISPR/Cas9 Gene EditingSB-431542DMSOPancreatic Islet Endothelial MS1 CellsCell CultureCell Morphology

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