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Valutazione delle interazioni proteiche nelle cellule vive con emissione sensibilizzata alla FRET
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
DOI:

09:15 min

April 22, 2021

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

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Il trasferimento di energia di risonanza di Förster (FRET) tra due molecole di fluorofori può essere utilizzato per studiare le interazioni proteiche nella cellula vivente. Qui, viene fornito un protocollo su come misurare la FRET nelle cellule vive rilevando l'emissione sensibilizzata dell'accettore e la tempra della molecola donatrice utilizzando la microscopia a scansione laser confocale.

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