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Abgabe des Cas9/sgRNA Ribonukleoprotein-Komplexes in Immortalisierte und Primärzellen über virusähnliche Partikel ("Nanoblades")
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles (“Nanoblades”)
DOI:

09:23 min

March 31, 2021

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:56Nanoblade Preparation
  • 02:45Concentration of Nanoblades on a Sucrose-Cushion
  • 04:16Monitoring Cas9 Loading Within Nanoblades and Transduction of Cells
  • 06:24Results: Characterization of Nanoblades
  • 08:29Conclusion

Summary

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Wir haben ein einfaches und kostengünstiges Protokoll entwickelt, um Cas9/Single-Guide-RNA (sgRNA)-Ribonukleoproteinkomplexe in virusähnliche Partikel zu laden. Diese Partikel, "Nanoblades" genannt, ermöglichen eine effiziente Abgabe des Cas9/sgRNA-Komplexes in immortalisierten und primären Zellen sowie in vivo.

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