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Imaging time-lapse dell'arborizzazione neuronale utilizzando l'etichettatura del virus adeno-associato sparso di popolazioni di cellule retiniche geneticamente mirate
JoVE 신문
신경과학
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JoVE 신문 신경과학
Time-Lapse Imaging of Neuronal Arborization using Sparse Adeno-Associated Virus Labeling of Genetically Targeted Retinal Cell Populations
DOI:

13:13 min

March 19, 2021

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:58Adeno-Associated Virus (AAV) Preparation and Intravitreal Injection of Neonatal Mice
  • 03:13Retinal Dissections for Live-Imaging Experiment
  • 05:04Retinal Flat-Mount Preparation
  • 06:35Time-Lapse Confocal Imaging of Live Whole-Mount Retina Preparations
  • 08:33Image Deconvolution and Post-Processing in ImageJ
  • 11:16Results: Representative Results After Neonatal Intraocular Injection, Time-Lapse Imaging, and Deconvolution
  • 12:13Conclusion

Summary

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Qui, presentiamo un metodo per studiare la morfogenesi dei neuriti negli espianti retinici postnatali di topo mediante microscopia confocale time-lapse. Descriviamo un approccio per l'etichettatura sparsa e l'acquisizione di tipi di cellule retiniche e dei loro processi fini utilizzando vettori virali adeno-associati ricombinanti che esprimono proteine fluorescenti mirate alla membrana in modo Cre-dipendente.

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