This content is Free Access.
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
- 02:18PCR
- 03:03Droplet Reading
- 03:31Analysis
- 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
- 05:27Conclusion
פרוטוקול זה מספק את השלבים החל מיצוי DNA ועד לערך ניסיוני עבור PCR טיפה דיגיטלית (ddPCR), כולל ניתוח לזיהוי וכימות של אירועי הצטרפות קצה לא הומולוגיים (NHEJ) באתרי יעד לאחר מחשוף Cas9 המושרה על ידי gRNA ותיקון DNA. שימושים אחרים בשיטה זו כוללים יישומים כגון זיהוי פולימורפיזם ואימות וריאנט עריכת גנים.
