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단백질 티올 산화의 다중화 정량화를 위한 등압 탠덤 질량 태그 라벨링과 결합된 수지 보조 포획
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JoVE 신문 생화학
Resin-Assisted Capture Coupled with Isobaric Tandem Mass Tag Labeling for Multiplexed Quantification of Protein Thiol Oxidation
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단백질 티올 산화의 다중화 정량화를 위한 등압 탠덤 질량 태그 라벨링과 결합된 수지 보조 포획

DOI:
10.3791/62671-v

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07:16 min

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June 21, 2021

•

, , ,
1Integrative Omics, Biological Sciences Division,Pacific Northwest National Laboratory, 2Bioproducts Sciences and Engineering Laboratory, Department of Biological Systems Engineering,Washington State University

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:31Resin-Assisted Capture
  • 03:52On-Resin Tryptic Digestion and Tandem Mass Tag (TMT) Labeling
  • 04:45Peptide Elution
  • 05:47Results: Analysis of Peptides from Resin-Assisted Capture Enrichment
  • 06:35Conclusion

Summary

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단백질 티올 산화는 정상적인 생리적 및 병리생리학적 조건 하에서 중요한 의미를 갖는다. 자사는 수지 보조 포획, 등압 표지 및 질량분석법을 활용하여 단백질의 가역적으로 산화된 시스테인 잔기의 부위별 식별 및 정량화를 가능하게 하는 정량적 산화 환원 단백질체학 방법의 세부 사항을 설명합니다.

Tags

Protein Thiol OxidationResin-assisted CaptureIsobaric Tandem Mass Tag LabelingQuantificationCystine ResiduesSample PreparationAcetone WashProtein SolubilizationBCA AssayCentrifugal FiltrationProtein ReductionDTTBuffer Exchange

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