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Produção rápida, acessível e descomplicada de lysate sem células bacterianas
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JoVE 신문 생물학
Rapid, Affordable, and Uncomplicated Production of Bacterial Cell-free Lysate

Produção rápida, acessível e descomplicada de lysate sem células bacterianas

DOI:
10.3791/62753-v

•

06:03 min

•

October 29, 2021

•

, , ,
1Biocircuits Institute,University of California, San Diego, 2Present address,Kyoto Institute of Technology, 3Present address,Vertex Pharmaceuticals, 4Department of Bioengineering,University of California, San Diego, 5Molecular Biology Section,University of California, San Diego

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:38Cell Preparation
  • 02:05Lysate Preparation
  • 04:13Cell-Free Gene Expression
  • 04:47Results: Green Fluorescent Protein (GFP) Expression Using the Autolysate
  • 05:18Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve um método rápido e simples para produzir lisenato bacteriano para expressão genética livre de células, usando uma cepa projetada de Escherichia coli e exigindo apenas equipamentos de laboratório padrão.

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Bacterial Cell-free LysateCell-free Gene ExpressionAutolysis E. ColiLB AgarAmpicillinStarter Culture2xYTPG MediumOptical DensityCentrifugationS30A BufferDithiothreitol

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