Transposon-insertion Sequencing as a Tool to Elucidate Bacterial Colonization Factors in a Burkholderia gladioli Symbiont of Lagria villosa Beetles

Ramya Ganesan; Martin Kaltenpoth; Laura V. Fl&#243;rez

doi:10.3791/62843

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Sequenziamento trasposone-inserzione come strumento per chiarire i fattori di colonizzazione batterica in un simbionte gladioli Burkholderia di Coleotteri Lagria villosa

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Transposon-insertion Sequencing as a Tool to Elucidate Bacterial Colonization Factors in a Burkholderia gladioli Symbiont of Lagria villosa Beetles

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Sequenziamento trasposone-inserzione come strumento per chiarire i fattori di colonizzazione batterica in un simbionte gladioli Burkholderia di Coleotteri Lagria villosa

DOI:

10.3791/62843-v

•

09:55 min

•

August 12, 2021

•

Ramya Ganesan, Martin Kaltenpoth², Laura V. Flórez³

¹Department of Evolutionary Ecology, Institute of Organismic and Molecular Evolution,Johannes Gutenberg University, ²Department of Insect Symbiosis,Max Planck Institute for Chemical Ecology, ³Department of Plant and Environmental Sciences, Section for Organismal Biology,University of Copenhagen

Chapters

00:04Introduction
00:30Conjugation to Generate the Transposon Mutant Library
03:32Mutant Pool Infection on Beetle Eggs
04:43Sequencing Library Preparation
08:34Results: Transposon-insertion Sequencing as a Tool to Elucidate Bacterial Colonization Factors
09:11Conclusion

Summary

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Questo è un metodo adattato per identificare i potenziali fattori di colonizzazione degli insetti in un simbionte benefico Burkholderia. L'ospite coleottero è infettato da una libreria mutante casuale generata tramite mutagenesi trasposone e la complessità della libreria dopo la colonizzazione viene confrontata con un controllo coltivato in vitro.

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