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면역학 및 감염병학
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マイクロインジェクションによる ストロンギロイデス 種におけるトランスジェニックとノックアウトの生成
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Generating Transgenics and Knockouts in Strongyloides Species by Microinjection
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マイクロインジェクションによる ストロンギロイデス 種におけるトランスジェニックとノックアウトの生成

DOI:
10.3791/63023-v

•

09:42 min

•

October 07, 2021

•

,
1Department of Microbiology, Immunology, and Molecular Genetics,University of California, Los Angeles, 2Molecular Biology Institute,University of California, Los Angeles

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:37Preparation of Microinjection Slides
  • 01:19Collection of Young Adult Strongyloides for Microinjection
  • 03:19Preparing the Microscope and Breaking the Needle
  • 05:27Microinjecting Strongyloides
  • 07:22Collecting and Screening F1 Larvae to Recover Transgenics/Knockouts
  • 08:31Results: Generating Transgenics and Knockouts in Strongyloides Species Using Intragonadal Microinjection
  • 09:04Conclusion

Summary

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寄生性線虫 Strongyloides stercoralis および Strongyloides ratti のための機能的ゲノムツールキットには、トランスジェネシス、CRISPR/Cas9媒介突然変異誘発、およびRNAiが含まれる。このプロトコルは、生殖腺内マイクロインジェクションを使用して、導入遺伝子およびCRISPR成分を S. stercoralis および S. rattiに導入する方法を実証する。

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Keywords: MicroinjectionTransgenicsKnockoutsStrongyloidesParasitesWormsBaermannFecal-charcoalNematode Growth MediumE. Coli HB101

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