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Colunas de cromatografia de afinidade de membrana celular para identificar metabólitos de plantas especializadas interagindo com tropomyosina quinase imobilizada receptor B
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JoVE 신문 생화학
Cellular Membrane Affinity Chromatography Columns to Identify Specialized Plant Metabolites Interacting with Immobilized Tropomyosin Kinase Receptor B

Colunas de cromatografia de afinidade de membrana celular para identificar metabólitos de plantas especializadas interagindo com tropomyosina quinase imobilizada receptor B

DOI:
10.3791/63118-v

•

11:44 min

•

January 19, 2022

•

, , , ,
1Department of Biological Sciences,The University of Alabama, 2Department of Pharmaceutical Botany, Faculty of Pharmacy,Hacettepe University

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:52Cell Homogenization
  • 03:56Cell Membrane Solubilization
  • 04:46Cell Membrane Immobilization on IAM.PC.DD2 Particles
  • 06:23CMAC Column Packing
  • 08:57Results: Antibody Staining and Frontal Affinity Chromatography of Immobilized TrkB Receptors
  • 11:02Conclusion

Summary

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O protocolo descreve a preparação de colunas de cromatografia de afinidade de membrana celular (CMAC) com fragmentos de membrana celular imobilizada contendo proteínas funcionais do receptor B transmembrano. Também é explicado o uso de colunas CMAC na identificação de metabólitos de plantas especializadas interagindo com esses receptores e presentes em complexas misturas naturais.

Tags

Keywords: Cellular Membrane Affinity ChromatographyTransmembrane ReceptorsPlant MetabolitesTropomyosin Kinase ReceptorBenzamidinePMSFProtease InhibitorATPTris-HCl BufferHomogenization BufferCell HarvestingCell LysisColumn Preparation

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